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      BioThema 266-111说明书

      点击次数:90 发布时间:2018/12/11
      提 供 商: 上海起发实验试剂有限公司 资料大小:
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      资料类型: PDF 浏览次数: 90
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      BioThema完全专注于萤火虫荧光素酶反应的分析应用,无论是检测细胞,测量酶活性还是其他东西。在该反应中,用ATP(三磷酸腺苷)活化虫荧光素,然后氧化成氧化虫荧光素和CO 2。氧化虫荧光素以激发态形成,并在进入其基态时发光。通常在所谓的发光计中测量光。

      ATP +虫荧光素+ O 2 -荧光素酶 - > AMP +焦磷酸+氧化虫荧光素+ CO 2 +光

      在ATP的测定中,光发射可以基本上恒定或快速衰减。因此,基于萤火虫荧光素酶反应,存在稳定的光和闪光型ATP试剂。在荧光素酶水平低的情况下,每分钟消耗的ATP比例可以忽略不计,然后光可以几乎恒定但也很低。在高水平的荧光素酶下,ATP被消耗是不可避免的,导致光迅速减少,但初峰值光很高。实际上,峰高和衰减率都与荧光素酶活性成比例。BioThema开发了三种ATP试剂

      BioThema 266-111说明书 

      SKU:266-111

      Intracellular ATP Kit HS

      细菌细胞内ATP的测定

      该试剂盒的灵敏度允许在各种情况下测定低ATP水平,条件是降解体细胞中的ATP并不重要:
      1。液体的细菌控制(例如饮用水,工艺用水,饮料和啤酒)
      2。药品和化妆品
      3.细胞与表面的粘合
      4.洗衣的质量保证
      5.细菌生长。
      6.对细菌的抗生素作用

       

       

      应用

      该试剂盒用于测定活细胞中的细胞内ATP(三磷酸腺苷)。样品中的细胞外ATP被酶促降解。如果样品还含有体细胞并且目的是确定微生物ATP,我们建议使用266-112微生物ATP试剂盒,包括用于大多数动物细胞的细胞裂解试剂。如果样品中只有一种类型的细胞且没有细胞外ATP,则可以使用266-311 ATP生物质试剂盒。所有活细胞都含有ATP,它在不同细胞过程之间起着能量货币的作用。当细胞死于自然原因时,ATP通常会降解。在所有类型的细胞中,小心地将ATP的细胞内浓度调节至相似水平。因此,ATP是细胞内总体积的良好估计。大多数细菌细胞含有大约。2×10-18 mol ATP /细胞,而大多数真核细胞由于其较大的尺寸,含有10-15 mol或更多的ATP。ATP生物质试剂盒HS,细胞内ATP试剂盒HS和微生物ATP试剂盒HS含有具有高荧光素酶活性的ATP试剂HS(高灵敏度)。ATP试剂HS中的荧光素酶活性实际上非常高,如果在重构过程中受到污染,它将每38分钟将ATP背景降低一个数量级。混合样品和ATP试剂HS后,光强度衰减约。每分钟6%。这足够慢以允许手动混合,并且可以使用没有试剂分配器的管发光计。试剂的检出限为10×10 -18使用灵敏的光度计测量ATP。这相当于5个细菌细胞。我们必须在这里区分细菌细胞和CFU,因为一个CFU可能由几个细胞组成。如果检测限不足,则可以通过微滤浓缩样品,该过程也将除去大部分细胞外ATP。

      仪器

      可以使用任何管或微孔板发光计。应该注意的是,管发光计比微孔板发光计灵敏度大约一个数量级。如果使用微孔板发光计,它应该至少有两个分配器,并且应该能够混合微孔板。

      分析程序

      详细描述的程序可在“使用说明”中找到,该说明书随每个套件一起提供。

      产品特性

      该试剂盒包含用于150-375测定的试剂(每个小瓶ATP试剂HS足以在管发光计中进行25次测定,在微孔板发光计中进行62.5次测定)。

      检测限:

      使用灵敏的发光计1,试剂的检出限为10×10-18 mol ATP 。

      参考

      1 Lundin,A。(2000)在生物量,酶和代谢物的ATP相关测定中使用萤火虫荧光素酶。方法Enzymol。305,346-370。
      2 Lundin,A。(1999)ATP检测生物污染。在“30th R3-Nordic Contamination Control Symposium”(Eds.G.Wirtanen,S.Salo and A. Mikkola),VTT,Espoo,Finland,pp.337-352。

       

       

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